细胞系在生物科学中被广泛使用，它们无限增殖的能力意味着，从理论上讲，科学家们可以精确地复制以前的研究重现实验结果或者在此结果基础上做更深入的研究。但是细胞系被贴错标签或处理不当会导致有问题的细胞系的错误识别，污染和/或传播，进而可能影响研究数据的有效性和准确性。

科学研究中所用细胞系的真实性验证是基础而且必要的。真实性验证能够确保细胞没有鉴定错误、没有交叉污染、遗传上与起始保存样品没有差异。那在科学研究工作中应该如何选择所需要的细胞？如何获取实验所需细胞？所选用的或得到的细胞可靠性如何？如何判断？这些问题对于需要使用细胞进行研究工作的科研人员是必须首先解决的问题。希望大家能在接下来的内容中找到答案。

一、细胞来源
细胞系可以 1) 直接从各种正常组织直接取材，进行原代培养，2) 可以从其他实验室获得，3) 也可以从细胞库购买。无论采用何种来源，都必须确保对细胞进行身份验证，并且没有污染，例如支原体。那不同来源的细胞需要注意哪些问题呢？
1、直接取材，进行原代培养获得
从新鲜组织中衍生出一种新的细胞系，特别是人类细胞，是一项昂贵且费时的工作。新细胞系的后续价值将取决于验证其来源的能力以及相关的可用信息。这些信息包括细胞来源组织，临床资料，其他相关信息。
（1）细胞来源组织：首先需要获得捐助者或患者的同意和/或道德审查许可。另外，要记录组织来源，进行组织病理学验证，与正常组织进行比较。
（a）将用于原代培养的一小部分样品（或血液样品或来自供体的 DNA）立即冷冻或处理。然后可以使用组织或 DNA 明确证明该细胞系源自推定的供体。尽管基因型（核型，拷贝数变异（CNV）作图分析，甚至全基因组序列）的其他信息有时会有助于确保身份，但建议采用短串联重复序列（STR）进行身份验证。
（b）最理想的情况是，用于组织病理学验证的组织最好由同一组织病理学家报告手术标本。如果患者样本由临床医生直接提供给实验室，则此步骤特别重要，因为它可能无法代表发送给组织病理学家的手术样本。例如，它可能距肿瘤一定距离并因此缺乏癌细胞，或者可能来自不受遗传或表观遗传缺陷引起的特定病理学影响的区域。
（c）少量血液（例如 10 毫升）或正常组织应冷冻。该组织以后可用于寻找遗传差异，也可用于身份验证。对于 iPSC 品系，或当使用直接重编程从一种衍生出另一种体细胞类型时，冷冻保存所用原始细胞的储备液也是一种好习惯。这些对于使用新的重编程技术衍生出其他细胞系可能很重要，而且对于提供原始供体材料以验证使用该细胞系的后来发现也可能很重要。如果使用体细胞核移植（SCNT）或「克隆」技术来衍生细胞系，例如 ES 细胞，则应分别保留来自体细胞供体和卵母细胞供体的细胞或组织，以匹配核和线粒体 DNA。

（2）临床资料：如果捐赠者或患者表示同意并经过道德审查，则应尽可能多地记录和存储以下尽可能多的信息。用于明确识别捐赠者的信息（包括姓名，医院编号，地址和出生日期）应以更高的安全性存储，最好与其他数据分开存储。在英国，需要 NHS 合同或名誉合同来获得患者详细信息，并且此类信息切勿与未经授权的同事共享或发布到公共领域。
（a）供体/患者的年龄和性别
（b）医院和病理编号
（c）组织标本的起源部位和性质
（d）癌症或其他综合症或病理的阶段和等级
（e）组织病理学报告的副本
（f）临床病史包括治疗
（g）其他信息，例如肿瘤标记物状态，遗传信息和家庭数据等
（h）捐助者的知情同意和放弃商业权利的证据

（3）其他相关信息：关于该细胞系的起源和派生保留的信息越多，该细胞系对始发者和任何后续用户有用的可能性就越大。这些信息包括：所有培养基和添加剂的类型，来源和批号以及建立细胞系的方法；使用抗生素情况，支原体检测情况；细胞系是否经过基因修饰；对于 iPSC 或通过直接重编程衍生的细胞系，应描述所用方法，包括所用基因和载体等等。

2、从其他实验室获得
从其他实验获得细胞这种途径存在许多潜在的危害。细胞系可能根本不是他们声称的那样，并且不能保证它仍然是同一细胞系或具有与已发布描述的相同属性。如果接收实验室希望依靠通过细胞系获得的历史数据，则在接受进入的细胞系用于一般用途之前，应进行验证。
在收到细胞细后，同时在在冻存之前，应使用已经批准的基于 DNA 的方法进行细胞系鉴定，以确认细胞系的起源并检查错误识别。对照国际细胞系认证委员会（ICLAC）错误识别的细胞系数据库来检查细胞系名称。在将新的细胞系存入液氮时应重新用 STR 对细胞身份进行验证。人类细胞系可能携带病原体，包括病毒污染，对实验室工作人员构成潜在的健康危害。它们还可能被细菌，真菌，支原体或病毒污染，并可能扩散到其他细胞系。如果要将这些细胞用于动物，必须对它们进行测试并证明不含相关病原体，这一点也很重要。否则这些病原体可能会对动物或者照顾动物的科研人员带来危害。
新细胞系应在实验室和储存中进行隔离，直到对它们的来源进行鉴定，并证明它们不含微生物。最佳方法是拥有 II 级微生物安全柜（MSC）和专用于隔离区的培养箱。如果无法做到这一点，则应采取其他步骤以最大程度地减少污染扩散的风险，其中包括（a）仅当当天所有其他细胞培养完成后才对新细胞系进行处理，（b）在进入普通培养箱之前，应应将新的培养物放置在专用培养箱中或密封容器中；（c）使用后，应使用合适的非腐蚀性消毒剂清洁 MSC，并在关闭前再运行至少 5 分钟。
用户还应确认他们获得的细胞系适合于他们自己的特定目的。即使显示出细胞系是真实的，它也可能会随着传代时间的延长而失去特定的关键特征。 核型分析是一种简单的测试，可以揭示细胞系的变化。在开始工作之前确认适当的特性可以节省大量的时间和精力。

3、从细胞库购买
学术机构或商业机构已经建立了许多保藏中心或细胞库。这些来源的细胞系已经进行了验证，并鉴定其在培养物中常见的污染微生物，因此除非随附信息中另有说明，否则它们不太可能被污染或错误识别。但是，其中一些细胞系是在实验室之间多次转移后获得的，因此，除非在分析证书中明确说明，否则不能保证真实性和不受微生物污染的影响。这些保藏中心或者细胞库会对其细胞系进行常规验证，并为细胞系提供分析证书，包括 STR 分型报告。