DEAE-琼脂糖凝胶FF使用方法

1.产品介绍
DEAE-琼脂糖凝胶FF是一种将二乙胺基乙基键合在琼脂糖微球上形成的带有弱碱阴离子基团的层析分离介质。
该产品保留了琼脂糖极好的亲水性及大网架结构,与生物活性大分子有很好的相容性,具有离子交换容量高,、特异性吸附少和流速快等特点,广泛用于蛋白质、核酸、多肽及多糖等生物大分子的实验室规模制备以及生物制药、生物工程的工业化制备。

2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、20ml、100ml、500ml
3.产品性能
性能     指标
基质     6%琼脂糖微球
离子交换类型     弱碱性阴离子基团
配体     -O-CH2CH2-N+(C2H5)2H
配体密度     100~180μmol/ml
载量     约110mg BSA/ml
粒径     45~165μm
推荐流速/*流速     50~100/700 cm/h
耐反压     0.3MPa
工作温度     4~40℃
耐热     PH7.0水中,120℃灭菌30min
pH稳定范围:长时间/短时间     2~12/1~14
储存缓冲液     20%乙醇
储存温度     4-8℃

4.使用方法
①平衡
用2~5个柱体积的初始缓冲溶液进行平衡,建议流速为100 cm/h。
观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数不变。
②上样
样品的预处理:样品需用0.45μm滤膜过滤,在上样,以免堵塞层析柱。
上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可通过线性实验找到*上样量。
③淋洗
用2~3个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗,观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数基本不变。
④洗脱
可用恒定洗脱、梯度洗脱或者阶跃洗脱。
一般推荐使用增大盐浓度的梯度洗脱。

5.再生、清洗、保存
①凝胶再生
(1)用高盐浓度的缓冲液(含1~2 M NaCl)按操作流速冲洗3~5个柱体积,接着用平衡液洗到平衡3~5个柱体积。
(2)再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗法除去。
②在位清洗
(1)去除强结合的蛋白质或脂类物质:1 M NaOH洗2个柱体积,8 M尿素洗2个柱体积, 30%异丙醇洗2个柱体积,平衡缓冲液洗2个柱体积。
(2)去除内毒素热原:1 M NaOH清洗1~2 h,速度50 cm/h,再用无热原的1M NaCl溶液置换(OH-置换为Cl-)。
(3)在位清洗可有效去除介质上的杂质,反向清洗效果更佳

6.注意事项:
1)使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
2)在常用水相缓冲液、1M NaOH、8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇中稳定
3)本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃。
4)2-25℃,常压,避光运输
5)仅供科研实验使用