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    上海 嘉定区

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卵黄甘露醇高盐琼脂基础操作步骤

291 人阅读发布时间:2021-04-07 15:14

产品名称:卵黄甘露醇高盐琼脂基础
英文名称:Egg-Manitol Salt Agar
用途:用于食品中金黄色葡萄球菌的选择性分离培养
规格:250g
保存方法:防潮、避光、阴凉处保存。
贮存:培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。

用法:称取本品 109.0g,加入 1000ml 蒸馏水中,加热溶解并不停搅拌煮沸 1 分钟。121℃高压灭菌15 分钟,冷至 45-50℃左右时,倾入无菌平皿。

操作步骤:
(一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
(二)校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1N NaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。
(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好。
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