MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒说明书

中文名称:MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
英文名称:MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
产品规格：100t/500t
用途：又称四氮唑盐,常用于细胞增殖及细胞毒性检测
储存条件：-20℃，避光，12个月

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)是一种非常经典的细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒，被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的检测。
MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物formazan(图1A)。在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解(图1B)。然后通过酶标仪可以测定570nm波长附近的吸光度(图2)。细胞增殖越多越快，则吸光度越高；细胞毒性越大，则吸光度越低。

图1.MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒实测效果图。A.HeLa细胞加入使用本试剂盒配制的MTT溶液，在细胞培养箱内孵育4小时，显微镜下可见大量结晶状的深紫色产物formazan生成。B.不同数量HeLa细胞在MTT溶液(MTT solution)加入后4小时的效果图(上图)及深紫色产物formazan生成后加入Formazan溶解液(Formazan solvent)，充分溶解后的效果图(下图)。
图2. 本试剂盒检测不同数量HeLa细胞的效果图。不同的检测条件下，实际读数会因标准品的配制、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
本试剂盒采用了独特的Formazan 溶解液配方，无需去除原有的培养液，可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。从而避免了由于去除培养液时formazan被部分去除而引起的误差。
本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。

保存条件：4℃或-20℃保存，MTT需避光保存，一年有效；MTT配制成溶液后需-20℃避光保存；Formazan溶解液也可以室温保存。

注意事项：
由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发的问 题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加PBS，水或培养液；另一方面 ，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。
MTT溶剂在低温情况下会凝固，使用前请室温放置或20-25℃水浴温育片刻 至全部融解后使用。
MTT配制成溶液后为黄色，需避光保存，长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时，请勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解 后使用。
Formazan溶解液结冻或产生沉淀时可以室温或37℃水浴孵育以促进溶解，并且必须在全部溶解并混匀后使用。加入Formazan溶解液后请适当轻轻混匀，但须注意避免产生泡沫。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。