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上海远慕生物科技有限公司
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如何看出细胞培养液体中存在支原体?
人阅读 发布时间:2023-10-23 11:29
如何看出细胞培养液体中存在支原体?
1. 观察细胞的形态和生长特征:
支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,以此可依次对支原体污染进行检测,但有些情况下支原体污染引起的病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。
2. 分离培养法:
大多数支原体可出现特有的典型菌落。因而可依次尽心检测,该方法准确、可靠,但时间长,敏感性不够高。
3. DNA结合荧光素染色法:
利用荧光染剂(bisbenzimide,Hoechst 33258)侦测支原体污染。荧光染料会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之荧光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。
1. 观察细胞的形态和生长特征:
支原体污染比较严重时可出现生长减慢,有的培养基pH明显变酸,并出现细胞病变,以此可依次对支原体污染进行检测,但有些情况下支原体污染引起的病变特征与病毒感染相似,因此不能准确诊断。
2. 分离培养法:
大多数支原体可出现特有的典型菌落。因而可依次尽心检测,该方法准确、可靠,但时间长,敏感性不够高。
3. DNA结合荧光素染色法:
利用荧光染剂(bisbenzimide,Hoechst 33258)侦测支原体污染。荧光染料会结合到DNA之Adenosine-Thymidine (A-T) rich区域,因为支原体DNA中A-T含量占多数(55~80%),所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后,在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之荧光小点,即为支原体之DNA,证明有支原体之污染。