上海远慕生物科技有限公司 品牌商

12 年

手机商铺

商家活跃:
产品热度:
品牌商

上海远慕生物科技有限公司

入驻年限:12 年

  • 联系人:

    王宇豪

  • 所在地区:

    上海 嘉定区

  • 业务范围:

    试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材、书籍 / 软件、论文服务、原辅料包材、医疗器械、体外诊断

  • 经营模式:

    经销商 代理商 科研机构

在线沟通
推荐产品

C57小鼠血清

品牌:远慕生物

¥1950

咨询

猴IgG

品牌:远慕生物

¥560

咨询

C57小鼠血浆

品牌:远慕生物

询价

询价
查看全部产品

公司新闻/正文

如何评估质粒DNA的产量和质量?

人阅读 发布时间:2023-02-21 09:48

质粒抽提过程中有很多步骤会影响最后的产量和质量,那么如何评估质粒DNA的产量和质量呢?

目前使用分光光度法定量质粒DNA和通过琼脂糖凝胶电泳进行质粒DNA产率和质量的分析是两种最常用的方法。

溶液中的核酸浓度可通过260 nm的吸光度方便地进行计算。A260的数值处于0.1至1.0之间时测量结果具有良好的重复性,但当A260数值小于0.1或大于1.0的时候,结果的可重复性将显著下降。而且,3.0以上的读值是无法使用的,它可能会潜在导致对DNA质量的低估。因此,为了获得可靠的DNA分光光度定量结果,A260的读值需要处于0.1至1.0之间。当检测小量DNA时,使用琼脂糖凝胶电泳进行的定量分析可能更为可靠。

造成较低的产率和质量的可能因素有很多。为了确定存在问题的环节,可于每一纯化步骤都保留一小部分样品,并通过琼脂糖凝胶电泳进行分析。

制备样本

如各个实验方案和下列表格中所示,从澄清裂解液(样本1)、流出液(样本2)、QC洗涤缓冲液的混合组分(样本3)和QF/QN缓冲液洗脱产物(样本4)中各取出部分样品。使用1倍体积的异丙醇沉淀核酸,并使用70%的乙醇洗涤该沉淀,充分蒸干后重悬于10 µl pH8.0的TE缓冲液中。

样本实验方案步骤 MidiMaxiMegaGiga(极低拷贝数质粒/科斯质粒) QIAGEN-tip 100(极低拷贝数质粒/科斯质粒)QIAGEN-tip 5001240 µl120 µl120 µl75 µl600 µl750 µl2240 µl120 µl120 µl75 µl50 µl24 µl3400 µl240 µl160 µl120 µl200 µl120 µl4100 µl60 µl22 µl20 µl50 µl30 µl(制备产物占样本量的百分比)2%0.40%0.08%0.02%1%0.20%

琼脂糖凝胶分析
在1%的琼脂糖凝胶中,对于各个质粒纯化步骤中的对应样品各加入2 µl进行电泳。

上一篇

细胞培养中常见的生物污染类型分析

下一篇

简述蛋白酶和溶菌酶(蛋白酶的基本分类)

更多资讯

询价列表

暂时没有已询价产品

快捷询价 发送名片
    当你希望让更多商家联系你时,可以勾选后发送询价,平台会将你的询价消息推荐给更多商家。