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上海远慕生物科技有限公司
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试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒、技术服务、耗材、书籍 / 软件、论文服务、原辅料包材、医疗器械、体外诊断
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远慕问您:转化大肠杆菌实验的目的是哪三个方面呢?
人阅读 发布时间:2019-11-04 14:07
又迎来了一个新的工作日,可能刚起床那会还是睡眼惺忪,但是上班的时候可就要进入工作状态啦!相信当聪明的您在看到本文章的标题时就能够知道,我们今天要为您谈说的是关于转化大肠杆菌的实验。
远慕问您:转化大肠杆菌实验的目的是哪三个方面呢?当然,这可不止简单的一个问题,既然我们问出了,那么就有答案啦。如果您现在移动右手中的鼠标去搜索转化大肠杆菌实验的话一定会出现很多的相关资料,有朋友在购买我公司的产品后提出了需要技术指导,那么我们今天就来仔细的看看本实验,*终来解答实验的目的是哪三个方面。
我们为您整理的这套实验过程简单明了,只需要十个步骤就可以完成。
1、事先将恒温水浴的温度调到42℃。
2、从-70℃ 超低温冰柜中取出一管(100 μl)感受态菌,立即用手指加温融化后插入冰上,冰浴5~10 min。
3、加入5 μl 连接好的质粒混合液(DNA含量不超过100 ng),轻轻震荡后放置冰上20 min。
4、轻轻摇匀后插入42℃水浴中1~2 min进行热休克,然后迅速放回冰中,静置3~5 min。
5、在超净工作台中向上述各管中分别加入500 μl LB培养基(不含抗菌素)轻轻混匀,然后固定到摇床的弹簧架上37℃震荡1 h。
6、在超净工作台中取上述转化混合液100-300 μl,分别滴到含合适抗菌素的固体LB平板培养皿中,用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。
7、如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话,滴完菌液后再在平板上滴加40 μl 2% X-gal,8 μl 20% IPTG,用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。
8、在涂好的培养皿上做上标记,先放置在37℃恒温培养箱中30~60 min 直到表面的液体都渗透到培养基里后,再倒置过来放入37℃恒温培养箱过夜。
9、在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇,擦干桌面,写实验报告。
10、观察平板上长出的菌落克隆,以菌落之间能互相分开为好。注意白色菌斑。
上海远慕感谢您使用来时间观看了本篇文章,如果您有什么产品需要以及技术问题解惑都是可以来电给我公司询问的。旁余之话我们不多说,这里给出了一个小提醒,在操作时,玻璃涂布棒上的酒精熄灭后稍等片刻,待其冷却后再涂。实验过程中也要细心哦!
已经快要是文章的结尾了,您还记得我们给出的问题吗?在问题中已经表明实验目的为三个方面,我们*后就来看看究竟是哪三个方面。
1、用于分子生物学其他研究。
2、将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制,增殖和表达,以获得目的基因。
3、验证大肠杆菌感受态细胞效果。
远慕问您:转化大肠杆菌实验的目的是哪三个方面呢?当然,这可不止简单的一个问题,既然我们问出了,那么就有答案啦。如果您现在移动右手中的鼠标去搜索转化大肠杆菌实验的话一定会出现很多的相关资料,有朋友在购买我公司的产品后提出了需要技术指导,那么我们今天就来仔细的看看本实验,*终来解答实验的目的是哪三个方面。
我们为您整理的这套实验过程简单明了,只需要十个步骤就可以完成。
1、事先将恒温水浴的温度调到42℃。
2、从-70℃ 超低温冰柜中取出一管(100 μl)感受态菌,立即用手指加温融化后插入冰上,冰浴5~10 min。
3、加入5 μl 连接好的质粒混合液(DNA含量不超过100 ng),轻轻震荡后放置冰上20 min。
4、轻轻摇匀后插入42℃水浴中1~2 min进行热休克,然后迅速放回冰中,静置3~5 min。
5、在超净工作台中向上述各管中分别加入500 μl LB培养基(不含抗菌素)轻轻混匀,然后固定到摇床的弹簧架上37℃震荡1 h。
6、在超净工作台中取上述转化混合液100-300 μl,分别滴到含合适抗菌素的固体LB平板培养皿中,用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。
7、如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话,滴完菌液后再在平板上滴加40 μl 2% X-gal,8 μl 20% IPTG,用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。
8、在涂好的培养皿上做上标记,先放置在37℃恒温培养箱中30~60 min 直到表面的液体都渗透到培养基里后,再倒置过来放入37℃恒温培养箱过夜。
9、在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇,擦干桌面,写实验报告。
10、观察平板上长出的菌落克隆,以菌落之间能互相分开为好。注意白色菌斑。
上海远慕感谢您使用来时间观看了本篇文章,如果您有什么产品需要以及技术问题解惑都是可以来电给我公司询问的。旁余之话我们不多说,这里给出了一个小提醒,在操作时,玻璃涂布棒上的酒精熄灭后稍等片刻,待其冷却后再涂。实验过程中也要细心哦!
已经快要是文章的结尾了,您还记得我们给出的问题吗?在问题中已经表明实验目的为三个方面,我们*后就来看看究竟是哪三个方面。
1、用于分子生物学其他研究。
2、将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制,增殖和表达,以获得目的基因。
3、验证大肠杆菌感受态细胞效果。