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远慕生物:木瓜蛋白酶生产的方法

人阅读 发布时间:2019-08-26 11:23

木瓜蛋白酶,又称木瓜酶,是一种蛋白水解酶。木瓜蛋白酶是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶,广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内,其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸,属于巯基蛋白酶,它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点,因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。

由木瓜的未成熟果实,经提取乳液、凝固、沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗制品的应用为主。木瓜蛋白酶韵生产方法有三种,分别是直接热风烘干法、喷雾干燥法及膜分离冻干法。

直接烘干

生产方法较简单、快速,但生产出来的成品只是粗酶,杂质多、色泽差且微生物超标,酶活力也较低,只有60万~80万单位/g。多为个体工厂采用,已不能满足国内食品质量卫生安全等。

喷雾干燥

此法是先通过离心去除部分杂质后再进行喷雾干燥,所生产出的成品酶活力相对高,达到100万单位/g左右,杂质相对也较少,色泽相对也较白。但产品喷雾时容易粘壁,酶活损失较大,水溶性相对也较差,而且酶活稳定性也较差。

膜分离法

该生产方法不但避免了以上两种方法的缺点,且生产过程卫生安全,收率也高,所生产的成品酶活损失小,酶活力一般可达到280万~350万单位/g,最高可达400万单位/g,且酶活稳定性好,纯度高,色泽洁白,细菌数低,严格操作可达到医药级别。

其提取工艺条件为超声波功率300W,超声处理时间200s,果浆质量分数30%;经超声波强化提取,酶活力提高到原先的1.71倍;该酶在40℃以下,pH为5.4~6.0时酶活力相对稳定;EDTA、Cys和维生素C对酶活力具有激活作用,CuS04和ZnCl2具有抑制作用,而KCl、NaCI、CaCl2、MgS04对酶活力的影响不大。

木瓜蛋白酶的分离纯化工艺

采用初步采集处理,20%、40%硫酸铵分级沉淀、SP-sephadexC50柱色谱、羟基磷灰石柱色谱,从番木瓜乳汁中分离纯化木瓜蛋白酶。可获得比活为1184U/mg的纯酶,活力回收率为55.79%,纯度达到99.31%,为高纯度的木瓜蛋白酶。

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