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让细胞活跃的诀窍你了解吗?

发布时间:2018-09-10 16:49 点击次数:

细胞可是许多生物学实验的主角。如果细胞心情不好,那么实验的结果也不会好到哪儿去。如何让细胞快乐?下面就有小编带仔细了解一下吧!

1. 确保所有实验室材料都无菌

     交叉污染是细胞培养的大敌。即使是最轻微的污染,也可能毁了几个星期的成果。因培养箱内温暖潮湿,真菌极易生长,因此必须注意定期清洁。此外,在将培养瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,应用酒精擦拭干净,以避免污染。

2. 小心处理您的培养物

      细胞培养的脆弱性怎么强调也不为过。剧烈摇晃,或连续的温度波动可能会对生长产生不利的影响。确保培养箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。此外,尽量避免一次处理多个细胞系,因为它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定期完成STR图谱分析,以确认细胞系的身份。

3. 在使用前正确解冻细胞

     尽管解冻看起来是个简单的步骤,但必须操作得当,以免伤害细胞。长时间暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因此,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培养基稀释,以避免DMSO造成直接伤害。

4. 使用对数生长期的细胞

       细胞培养过程共有3个阶段:停滞期、对数期和平台期,分别代表了低细胞生长、高细胞生长和无细胞生长。最有活力的细胞是健康的,快速分裂的,在对数期以70-80%的汇合度存在。

5. 在传代之前不要让细胞完全汇合

    汇合度是指贴壁细胞占据培养瓶表面积的比例。完全汇合意味着100%的表面都被贴壁细胞覆盖。一定要避免这种状态,因为它意味着细胞不能继续生长。不过,当务之急是使用活跃生长的细胞。

6. 选择最佳的培养基开发策略

      在细胞培养过程中,培养基是控制产品质量、产量和成本的最重要因素。必须针对每种培养物来定制培养基,以优化实验结果。在决定以哪种方式来开发您的培养基时,您有几个选择。您可以购买现成的,自己开发,也可以与另一家公司合作开发特定的培养基。在这个过程中,您需要考虑时间和成本等因素。