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上海远慕生物科技有限公司
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动物血清的分离技术有哪些?
人阅读 发布时间:2018-07-30 11:42
血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。
血清分离,看你的要求,对于溶血程度,是否要求无菌等等,看你那的有要求什么的;用我的经历举例,我们的要求是尽可能无菌或减少污染,除了超净工作台之类的,我所通用的;
一、通过自然凝固的方法:
1、对于血液自然分离来说,选择呈装的材质最好是玻璃材质,它的分离效果要比塑料的材质好;
2、室外的温度不能过低,最好是25-30℃,因为由于血液体内的温度是37℃,到体外室温低的话,由于热胀冷缩,细胞破裂多,溶血后,血红素溢出会溶血增加;
3、有条件的话,而且容器也不大的情况下,可以放置恒温箱中30分钟-1.5个小时,如果能倾斜30度左右放置,效果更好,但是最好不要超过2个小时,不然溶血也会增加;
4、没有条件,可以室温倾斜放置过夜,第二天同样能得到淡黄色的血清;
5、为了得到更多的血清,这个时候我会移出血清,然后剩余的血块再3000rpm离心15-20分钟,这样还能得到一点;然后剩余的血块再放置在4℃冰箱再过夜,还能获得一些血清,但是这个时候的血清已经是溶血的血清了;
二、通过离心的方法:(加抗凝剂)
1、高速离心机(3000-12000rpm),首次离心不宜超过3000rpm,因为容易溶血,我一般2000rpm15分钟,因为我要除了要血浆外,还要完整的血细胞;
2、血浆再7000rpm,就能获得最理想的血浆量了;备注:我的呈装的容器是250ml葡萄糖瓶,因为需要无菌,所以都是分装后,然后上丁基胶塞离心或者自然分离;还有般情况下,自然析出的血清一般占总血的量35-45%;但是血浆的话,血浆占总血液体积的60-70%,量很可观。
血清分离,看你的要求,对于溶血程度,是否要求无菌等等,看你那的有要求什么的;用我的经历举例,我们的要求是尽可能无菌或减少污染,除了超净工作台之类的,我所通用的;
一、通过自然凝固的方法:
1、对于血液自然分离来说,选择呈装的材质最好是玻璃材质,它的分离效果要比塑料的材质好;
2、室外的温度不能过低,最好是25-30℃,因为由于血液体内的温度是37℃,到体外室温低的话,由于热胀冷缩,细胞破裂多,溶血后,血红素溢出会溶血增加;
3、有条件的话,而且容器也不大的情况下,可以放置恒温箱中30分钟-1.5个小时,如果能倾斜30度左右放置,效果更好,但是最好不要超过2个小时,不然溶血也会增加;
4、没有条件,可以室温倾斜放置过夜,第二天同样能得到淡黄色的血清;
5、为了得到更多的血清,这个时候我会移出血清,然后剩余的血块再3000rpm离心15-20分钟,这样还能得到一点;然后剩余的血块再放置在4℃冰箱再过夜,还能获得一些血清,但是这个时候的血清已经是溶血的血清了;
二、通过离心的方法:(加抗凝剂)
1、高速离心机(3000-12000rpm),首次离心不宜超过3000rpm,因为容易溶血,我一般2000rpm15分钟,因为我要除了要血浆外,还要完整的血细胞;
2、血浆再7000rpm,就能获得最理想的血浆量了;备注:我的呈装的容器是250ml葡萄糖瓶,因为需要无菌,所以都是分装后,然后上丁基胶塞离心或者自然分离;还有般情况下,自然析出的血清一般占总血的量35-45%;但是血浆的话,血浆占总血液体积的60-70%,量很可观。