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胶原蛋白9007-34-5标准品的提取方法有哪些?

人阅读 发布时间:2018-07-20 14:26

提取胶原蛋白的大概过程是去除油脂,去除杂蛋白,胶原蛋白析出,纯化等。它的提取方法有以下几种:热水提取法,酸提取法,碱提取和酶提取法。
1.热水提取法
热水提取法是将原料经过除杂蛋白等前处理之后,直接在热水中提取已经变性了的胶原蛋白或胶原蛋白水解物的方法,使用的温度有100℃沸水浴、60-70℃、40-42℃、45℃。
2.酸提取法
酸提取法常用的酸有:甲酸、乙酸、盐酸、草酸、柠檬酸、乳酸等。低离子浓度酸可以破坏分子间盐键和希夫氏碱,引起胶原纤维膨胀、溶解。
使用酸提取胶原时,根据酸浓度、水解温度、水解时间等条件的不同,可以得到分子量不均的胶原水解物。但是在等浓度酸彻底水解过程中色氨酸会全部被破坏,丝氨酸和酪氨酸也会部分被破坏。因此,酸法溶出生物医用胶原要准确控制酸度、温度、时间等影响因素。
3.碱提取法
碱提取通常使用氢氧化钠,碳酸钠等,碱性条件下提取胶原,易引起蛋白质变性,如胶原肽键水解,含羟基、疏基的氨基酸全部被破坏;所得产物等电点pH值较低,天冬酞胺和谷氨酞胺分别转变为天冬氨酸和谷氨酸;如果水解严重,则会产生D、L型氨基酸消旋混合物,若D型氨基酸含量高过L 型氨基酸,则会抑制L-型氨基酸的吸收,有些D型氨基酸有毒,有的甚至有致癌、致畸和致突变的作用。因此,在提取结构完整、使用安全的胶原时,很少采用碱法提取胶原。
4.酶提取法
用蛋白酶处理猪皮,不仅可以水解掉胶原纤维蛋白的末端肽,提高胶原蛋白的产率;而且还不会破坏胶原蛋白的三股螺旋结构,保持其优良的物理和生化特性。通常使用的蛋白酶主要有中性蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶等。影响酶提取的因素有很多,如酶浓度、酶与底物的比例、酶解时间、酶解温度、pH值以及料液比等。在实际操作中,大多数采用酶复合法提取胶原蛋白。
 

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