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小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)elisa试剂盒操作步骤

人阅读 发布时间:2016-03-29 11:46

    小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)elisa试剂盒操作步骤

    1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀

    释。

    2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

    待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

    3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

    4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用

    5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此

    重复5次,拍干。

    6.加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。

    7.温育:操作同3。

    8.洗涤:操作同5。

    9.显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色

    10分钟.

    10.终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

    11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。

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