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四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)使用方法

763 人阅读发布时间:2021-12-13 16:09

中文名称:四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)
英文名称:Tetrathionate Broth Base
产品规格:250g
用途:用于沙门氏菌选择性增菌培养,需加入煌绿和碘液(GB,SN标准)

培养基配方(每升):
蛋白胨 9g
牛肉膏粉 4.5g
氯化钠 2.7g
碳酸钙 40.5g
无水硫代硫酸钠 31.9g
牛胆盐5g
最终pH 7.0±0.2。

实验原理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供碳源、氮源和维生素满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌(四硫磺酸钠是在培养基加入碘和碘化钾时形成),而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其它革兰氏阳性细菌。

使用方法
1、称取本品93.6g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于三角瓶中,每瓶100mL。
2、将三角瓶放入灭菌锅中,121℃高压灭菌20min,冷至30℃,每100mL基础培养基中加入四硫磺酸钠煌绿增菌液配套试剂(SR0040)2支配成四硫磺酸钠煌绿增菌液或再添加2支新生霉素(SR0030)配成MKTTn肉汤,混合均匀。
3、在无菌环境中,移取增菌液1mL转种于10mlTTB/MKTTn中或移取前增菌液25ml转种于225mlTTB中。
4、将已接种的试管放入恒温培养箱中,42℃培养18-24h。
5、观察结果。
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