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技术资料/正文

冰冻切片快速抗原修复液操作方法

1506 人阅读发布时间:2021-11-23 14:33

产品名称:冰冻切片快速抗原修复液
规    格:100ml
用    途:适合用于冰冻切片的快速抗原修复液,只需室温孵育5分钟即可完成对冰冻切片样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
注意事项:本抗原修复液含有了广泛使用的SDS等抗原修复试剂等,pH值约为7.4,可以快速有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联。
储存条件:4℃,12个月

简介:
冰冻切片快速抗原修复液是一种特别适合用于冰冻切片的快速抗原修复液,只需室温孵育5分钟即可完成对冰冻切片样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。本产品特别适合用于冰冻切片的抗原修复并用于后续的免疫染色。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显着改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

规格说明:
一个包装的本产品可以配制成500毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于50个样品。按照每个片子需要5毫升抗原修复液(1X)计算,则一个包装的本产品可以用于100个样品。

操作方法:
对于石蜡切片:
脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。
抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,室温孵育5分钟。用免疫染色洗涤液洗涤3~5次,每次3~5分钟,以充分去除残留的SDS等试剂。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

对于冰冻切片:
用免疫染色洗涤液洗涤切片5分钟。将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,室温孵育约5分钟。用免疫染色洗涤液洗涤3~5次,每次3~5分钟,以充分去除残留的SDS等试剂。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。

对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。

注意事项:
抗原修复过程可以使用染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
本抗原修复液使用前必须先充分溶解并混匀,然后用重蒸水或MilliQ水稀释5倍,配制成抗原修复液(1X)。
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