甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)操作步骤

中文名称：甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)
产品规格：100ml
用途：细胞核染色、肥大细胞染色
注意事项 ：磷酸盐缓冲液配制,甲苯胺蓝中的阳离子与组织细胞的酸性物质结合而被染色。染色结果为：细胞核呈蓝色,而肥大细胞胞质内含有肝素等异色性物质呈异染性紫红色。
储存条件：室温，避光，12个月

简介：甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色。肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。

操作步骤(仅供参考)：
(一)肥大细胞染色
1、脱蜡至蒸馏水。
2、根据切片厚度和组织的不同，浸染于甲苯胺蓝染色液。
3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。
4、(可选)0.5%冰乙酸分化，直到细胞核和颗粒清晰可见。
5、快速95%和无水乙醇脱水。
6、二甲苯透明，封固。染色结果：肥大细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

(二)软骨染色
1、石蜡切片入二甲苯2次每次。
2、系列乙醇各1min。
3、自来水洗2min。
4、入ToluidineBlueOStain浸染。
5、自来水洗2min，滤纸吸干水分。
6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。
7、逐级乙醇脱水。
8、二甲苯透明，中性树胶封固。染色结果：软骨、成骨细胞呈紫红色；背景呈淡蓝色。

(三)细胞涂片染色
1、用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液,一般要求稀释到0.1%即可。
2、细胞涂片后，立即放入95%的乙醇中固定，取出放在纸巾上。
3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染，加盖玻片让染料渗透到细胞中。
4、将玻片竖起，稍加压力，使多余染料被纸巾吸去。
5、无需干燥，直接镜检。染色结果：细胞核、淋巴细胞呈深蓝色；核仁呈紫红色；红细胞呈橘红；细胞质、单核细胞呈淡蓝色。

(四)原位杂交染色
1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度，凭经验一般稀释比例大于1:100。
2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。
3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。
4、按需求进行压片固定。

注意事项：
1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色，浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。
2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。