乳糖肉汤(LB)操作步骤

中文名称：乳糖肉汤（LB）
英文名称：Lactose Broth
产品规格：250g
保质期：三年
类别：沙门氏菌、志贺氏菌检验培养基
乳糖肉汤（LB）用途：用于培养需氧菌、微需氧菌和厌氧菌，还用于药品生物制品的无菌试验，及食品中产气荚膜羧菌的厌氧培养。

原理：酪胨和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供可发酵有糖类更利于生长；氯化钠维持均衡的渗透压；硫乙醇酸钠和L—胱氨酸能有效降低氧化还原电位，防止过氧化物的积累对某些菌产生毒性，同时其硫氢基团有钝化含砷、汞及其它重金属防腐剂的抑菌作用；少量琼脂的凝固作用可防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散；刃天青是氧化还原指示剂，氧化状态呈粉红色，还原状态无色。


仪器与试剂 ：
1.托盘天平、消毒锅、电冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。


乳糖肉汤（LB）操作方法：
1.称取营养琼脂17克，于1000ml三角瓶内，加入500ml纯化水，充分搅拌后，塞上棉塞， 2.置消毒锅内，于115℃高压灭菌30分钟，取出放置至室温后，放入冰箱，备用（冰箱温度控制在1－4℃）。
3.使用时从冰箱取出，放置室温后，置水浴中加热，使融，全部融化后取出，放置约45℃时使用。
4.使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开牛皮纸包扎外壳，在火焰附近慢慢旋下棉塞，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约
15ml完毕后，将棉塞在火焰上方烧烤数秒，立即塞入瓶口，包上牛皮纸外层，用线绳扎好，留下次使用。（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。


培养注意事项：
1、检查平板内是否干裂或染菌，如长菌请勿使用；
2、请在洁净的环境下操作，避免杂菌干扰；
3、经过预培养的培养基严禁使用；
4、在冰箱储存很久的培养基容易出现一些冷凝水，请在洁净的环境下将水倒出，然后在培养箱放置10-30Min，待其表面干燥后再接种；或在使用前，提前一到两周放置室温即可；