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技术资料/正文

α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)

446 人阅读发布时间:2020-12-07 11:46

简介:酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specificesterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。每一种酯酶常能水解许多不同的底物,多种不同的酯酶又能水解相同的底物,因此这一系列酯酶被称为非特异性酯酶。非特异性酯酶的最适pH为5.0~8.0,定位于溶酶体和内质网,在肝脏、肾脏、胰和小肠具有较高的酶活性。单核-吞噬细胞系统的单核巨噬细胞、树突细胞也含有丰富的非特异性酯酶。α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)又称非特异性酯酶染色液,其原理是细胞中的非特异性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚,α-萘酚再与重氮盐偶联,生成不溶性有色沉淀,定位于细胞质。本染色液对酯酶染色无特异性,故又称作非特异性酯酶染色液,可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片的非特异性酯酶染色,亦可作氟化钠抑制试验。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料:
1、载玻片、湿盒
2、显微镜

操作步骤(仅供参考):
1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切入α-NAE固定液固定。
2、水洗,晾干。
3、入配制好的α-NAE孵育液,放入湿盒中,避光孵育,水洗。
4、入甲基绿染色液复染,水洗,镜检。

染色结果:
细胞质  灰黑色或棕黑色弥漫性或颗粒状沉淀
细胞核  绿色

氟化钠抑制实验:
按NaFsolution:α-NAE孵育液=1:25的比例,在α-NAE孵育液中加入NaFsolution,其余按上述染色法进行。

注意事项:
1、血液或骨髓细胞涂片应新鲜,薄厚适宜,一般2天内染色,否则会影响酶的活性。
2、α-NAE孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
3、α-NAE孵育液配制后易出现浑浊,但不会影响染色效果。
4、每次染色时,应有阳性对照片。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期:6个月有效期
资料格式:

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