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小鼠白细胞介素17F(IL-17F)ELISA试剂盒使用说明书

274 人阅读发布时间:2019-12-25 10:26

中文名:小鼠白细胞介素17F(IL-17F)ELISA试剂盒
规格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6个月
样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。
用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。
种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。
运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。
检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。


本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中小鼠白细胞介素的含量。有效期:6个月实验原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验往预先包被小鼠白细胞介素捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物显色,在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠白细胞介素呈正相关。用酶标仪在波长下测定吸光度值),计算样品浓度。样本处理及要求血清:全血标本请于室温放置过夜后于离心分钟,取上清即可检测,或将标本放于保存,但应避免反复冻融。或肝素作为抗凝剂,标本采集后分钟,或将标本放于或保存,但应避免反复冻融。组织匀浆:用预冷的冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的(一般按的重量体积比,比如的组织样品对应具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于离心分钟,取上清检测。细胞培养物上清或其它生物标本:离心分钟,取上清即可检测,或将标本放于或保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本处理
本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用的稀释
若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致实验结果偏差。
若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
需要而未提供的试剂和器材
酶标仪(450nm
高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL
37
恒温箱
蒸馏水或去离子水

 
注意事项
严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25。使用后立即冷藏保存试剂。
洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
在储存和温育时避免强光直接照射。
平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
不能使用过期产品。
如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

 
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按120稀释,即120×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
 
操作步骤
1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4
2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL
3.  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37水浴锅或恒温箱温育60min
5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6.  每孔加入底物AB50μL37避光孵育15min
7.  每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
实验结果计算
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
 
试剂盒性能
1.  检测范围:1.5 pg/mL – 48 pg/mL
2.  灵敏度:zui低检测浓度小于0.1 pg/mL
3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 
 
说明
1.  由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。
2.  zui终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,电子版说明书仅作参考。只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到好的检测结果。
资料格式:

小鼠白细胞介素17F(IL-17F)ELISA试剂盒使用说明书.doc

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